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一一解決對BI胎牛血清的疑問
  • 發布日期:2022-01-22      瀏覽次數:658
    •   BI胎牛血清組份的復雜性及作用機理的關聯性,使得人工無血清培養基添加物想要模擬胎牛血清組份的作用就難上加難了。但隨著細胞生物學及發酵制藥工業的發展,成本及潔凈程度的要求下,勢必會有新的人工替代試劑出現,而這需要我們科研人員的共同努力。
        BI胎牛血清使用中遇到的常見問題總結:
        問:加到培養基中的BI牛血清必須滅活嗎?
        答:不是必須的,看做什么實驗了。
        問:BI胎牛血清(Bioind胎牛血清)滅活是56℃ 30分鐘嗎?
        答:如果用于培養大多數的腫瘤細胞,血清一般是不需要滅活的,這樣可以有效保存血清中的生長因子。 但是如果用于培養一些表面具有補體受體的細胞,如內皮細胞,血清是需要滅活,一般是56℃,30min。
        問:我要做滋養細胞培養,胎牛血清要滅活嗎?
        答:進口的一般都已滅活,國產的不一定,還是滅活一下再用較安全。
        問:我用病毒上清轉染細胞,培養用的血清需要滅活嗎?因為血清中可能有些補體和抗體,是不是會影 響轉染?我想未滅活的血清中含些抗體補體可能會和病毒相結合,影響轉染,正確嗎?細胞是單核細胞白血病細胞, 病毒是病毒包裝細胞PT67收集的病毒上清。為什么要用無血清培養基加病毒孵育幾小時,目的是什么?
        答:血清一定要滅活,可以先用無血清培養基加病毒孵育幾小時以后再加血清。避免雜蛋白對病毒和宿主 結合過程的干擾,一般是2-6小時,根據細胞的狀態決定。血清不一定需要滅活,滅活的目的是將血清中的補體滅活 !這要根據實際情況而定,如果沒有把握那就滅活吧,也不麻煩56度半個小時。
        問:(1)我買的是BI胎牛血清,要滅活嗎?有些說法是需要,有些說直接解凍后就可以加入到培 養基中;我配制胰蛋白酶液,用的是D-PBS,有關系嗎?
        答:關于BI胎牛血清的熱滅活,是很多人感興趣也存在一定爭議的話題。大多數實驗室將血清的熱滅活還是作為 常規來執行,因為有兩個作用,第一是滅活補體,第二是滅活血清中可能存在的支原體。但是實驗者并沒有考慮熱處 理對血清中的生長因子 氨基酸等成分帶來的負面影響。
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